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葉綠素儀有關(guān)葉綠素a的測定過程概述

更新時(shí)間:2022-05-17點(diǎn)擊次數(shù):1308
   葉綠素儀是通過兩種光來檢測葉綠素含量的,在兩個(gè)不同波長區(qū)域,葉綠素對光吸收是不相同的,在這兩個(gè)不同波長區(qū)域下,根據(jù)光通過葉片傳輸數(shù)量的不同進(jìn)行葉綠素相對含量的計(jì)算。兩個(gè)LED光源發(fā)射兩種光,一種是紅光,一種是紅外線,兩種光穿透葉片,打到接收器上,光信號轉(zhuǎn)換成模擬信號,模擬信號被放大器放大,由模擬/數(shù)字轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號,數(shù)字信號被微處理器處理,計(jì)算出葉綠素值并顯示。
  有關(guān)葉綠素a的測定過程可能要用到分光光度計(jì)、天平、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、擦境紙、滴管等儀器。準(zhǔn)備幾片新鮮的植物葉片,準(zhǔn)備96%的乙醇、石英砂和碳酸鈣粉,具體操作步驟如下:
  取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料,擦凈組織表面污物,去除中脈剪碎。稱取剪碎的新鮮樣品2g,放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及3mL95%乙醇,研成均漿,再加乙醇10mL,繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3-5min。取濾紙1張置于漏斗中,用乙醇濕潤,沿玻棒把提取液倒入漏斗,濾液流至100mL棕色容量瓶中;用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次,后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分?。用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o綠色為止。后用乙醇定容至100mL,搖勻。取葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm和652nm下測定吸光度,以95%乙醇為空白對照。
  然后根據(jù)資料上提供的葉綠素a的計(jì)算方法,就可算出新鮮的植物葉片葉綠素a的含量。具體公式如下:
  葉綠素a=(12.7A665-2.69A645)·(V/1000W);
  葉綠素b=(12.7A645-2.69A665)·(V/1000W);
  總?cè)~綠素a=(20.0A645+8.02A665)·(V/1000W)或總?cè)~綠素a=(A652/34.5)·(V/1000W)。

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